1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟。
2. 脱蜡和水化：二甲苯(20min)→二甲苯(20min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(5min)→80%乙醇(5min)
3. PBS洗2次各5min，蒸馏水冲洗1次5min，
4. 抗原修复：压力锅开始喷气时，盖上气阀约1.5~2.5min，冷却，取下气阀，冷却至室温
5. 蒸馏水洗1次5min，PBS洗2次各5min
6. 加3%H2O2孵育30min(室温)
7. PBS洗3次各5min
8. 加兰色试剂，室温孵育30min，倾去，勿洗
9. 滴加一抗，37℃孵育2~3h，或4℃过夜
10. PBS冲洗3次各5min
11. 滴加黄色试剂(B)，37℃孵育30min
12. PBS洗3次各5min
13. 滴加试剂C(橙色)，37℃孵育30min
14. PBS洗3次各5min
15. DAB显色5~20min，自来水充分冲洗
16. 苏木素复染2~3min，自来水充分冲洗
17. 盐酸酒精分化2s，自来水充分冲洗
18. 脱水、透明80%(5min)→95%(5min)→95%(5min)→100%(5min)→100%(5min)→二甲苯(10min)→二甲苯(10min)
19. 封片：中性树脂，加盖玻片(组织部位切勿残留小气泡)，自然晾干
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